RNR išskyrimas iš saccharomyces cerevisiae ląstelių biomasės


Chemijos laboratorinis darbas.

Laboratorinis darbas nr. rnr išskyrimas iš saccharomyces cerevisiae ląstelių biomasės darbo tikslas.


0,264 g S.cerevisiae ląstelių biomasės suspenduojama 0,5 ml ląstelių lizės buferiniame tirpale (Nr.1). Maišoma 3 min, kol gaunama homogeninė suspensija.

Į mėgintuvėlį įpilama chloroformo/izopentilo alkoholio mišinio,kad santykis būtų 1:1. Tirpalas centrifuguojamas 5 min 14000 aps/min greičiu.

Su DNR priemaišomis iškritusios RNR nuosėdos centrifuguojamos 15 min 14000 aps/min greičiu.

Nupilamas viršutinis etanolio sluoksnis ir įpilama ~0,5 mL 70% etanolio. Tirpalas centrifuguojamas 5 min 14000 aps/min greičiu. Atsargiai pašalinamas alkoholis ir paliekama trumpam džiūti.

Į naują Ependorff tipo mėgintuvėlį paimama 10 µL gauto mišinio ir praskiedžiama vandeniu iki 1 mL, išmatuojamas optinis tankis 260 nm ir 280 nm bangos ilgyje. Iš gautų duomenų apskaičiuojama RNR koncentracija.

Į likusį 100 µL DNR + RNR tirpalą pridedama 10-20 vienetų deoksiribonukleazės (1-2 µL). Inkubuojama 37°C temperatūroje 15 min.

666

  • Chemija Laboratoriniai darbai
  • 2017 m.
  • Lietuvių
  • Kkk
  • 3 puslapiai (767 žodžiai)
  • Universitetas
  • Chemijos laboratoriniai darbai
  • Microsoft Word 350 KB
  • RNR išskyrimas iš saccharomyces cerevisiae ląstelių biomasės
    10 - 3 balsai (-ų)
RNR išskyrimas iš saccharomyces cerevisiae ląstelių biomasės. (2017 m. Balandžio 30 d.). http://www.mokslobaze.lt/rnr-isskyrimas-is-saccharomyces-cerevisiae-lasteliu-biomases.html Peržiūrėta 2017 m. Lapkričio 21 d. 19:33