Kiekybiniai baltymų nustatymo metodai


Laboratorinis darbas nr. Kiekybiniai baltymų nustatymo metodai Darbo tikslas. Visuose metoduose naudojami reagentai. Darbo metodas – Lowry metodas. Gauti rezultatai Tirpalas , C mg mL. 063 Rasta konc. Lowry metodo gautų optinių tankių kalibracinė kreivė. 063 - Tai yra nežinomo baltymo koncentracija mg mL Darbo metodas - Bradfordo metodas. 057 Rasta konc. Bradfordo metodo gautų optinių tankių kalibracinė kreivė. 057 - Tai yra nežinomo baltymo koncentracija mg mL Darbo metodas - Spektrofotometrinis metodas Tirpalas , C mg mL. 033 mg mL. Išvados Lowry metodas.


Darbo priemonės: Automatinės 20 μL, 200 μL, 1000 μL, 5000 μL pipetės, maišyklė, spektrofotometras SF26, svarstyklės, kiuvetės, cheminės stiklinėlės.

Visuose metoduose naudojami reagentai: Jaučio serumo albuminas (JSA), distiliuotas vanduo.

Kad sužinotume nežinomo mėgintuvėlio koncentraciją, galime remtis metodu, kuris teigia, jog esant baltymo koncentracijai 1 mg/mL, tirpalo sluoksnio storiui 1cm, optinis tankis yra lygus 1.

X = 0.033 mg/mL – tai gauta nežinomo baltymo koncentracija.

Šiuo metodu atlikus eksperimentą, gavosi geriausi rezultatai. Galima daryti išvadą, jog didėjant tirpalo koncentracijai, tolygiai didėja ir optinis tankis. Nežinomo baltymo koncentracija gavosi 0.063 mg/mL, kai optinis tankis yra 0.117A, o bangos ilgis 750nm. Šio baltymo koncentraciją gavome, pasinaudodami kalibracinės kreivės tiesine lygtimi.

Šiuo metodu atlikus eksperimentą, pirmųjų penkių mėgintuvėlių rezultatai gavosi neigiami, t. y. gavosi neigiamos optinio tankio reikšmės. Optinis tankis negali būti neigiamas. Taip galėjo atsitikti dėl netikslaus reagentų kiekio. Tačiau, galima pastebėti, jog didinant tirpalo koncentraciją, optinis tankis irgi didėja, o paskutiniųjų trijų mėgintuvėlių optiniai tankiai pasiekia teigiamas reikšmes.

  • Microsoft Word 38 KB
  • 2017 m.
  • Lietuvių
  • 6 puslapiai (677 žodžiai)
  • Universitetas
  • Danielė
  • Kiekybiniai baltymų nustatymo metodai
    10 - 2 balsai (-ų)
Kiekybiniai baltymų nustatymo metodai. (2017 m. Gruodžio 05 d.). https://www.mokslobaze.lt/kiekybiniai-baltymu-nustatymo-metodai.html Peržiūrėta 2019 m. Liepos 19 d. 11:51
×
Užduokite klausimą bet kuria mokslo tema